CD10和CD16中性粒细胞作为新生儿全身性感染发展的标志物

全文:

АКТУАЛЬНОСТЬ

В настоящее время сепсис определяется как «угрожающая жизни органная дисфункция, вызванная дисрегуляцией иммунного ответа на инфекцию», при его несвое временном/неадекватном лечении высока вероятность развития шока, полиорганной недостаточности и гибели больного [1]. Несмотря на прогресс современного инфекционного контроля, частота сепсиса у новорожденных составляет 0,1–0,8 % в общей популяции, а среди недоношенных детей, находящихся в отделении реанимации и интенсивной терапии (ОРИТ), — до 14 % с летальностью до 30–40 %; у новорожденных все еще выявляется до 3 млн новых случаев сепсиса в год [2].

Сегодня продолжается поиск и совершенствование ранних биомаркеров сепсиса, позволяющих, с одной стороны, заблаговременно интенсифицировать терапию у пациентов группы риска, и с другой — отказаться от избыточного назначения антибиотиков с целью предотвращения развития полирезистентной внутрибольничной флоры. Поскольку нейтрофилы наиболее динамично реагируют на внедрение инфекции, их функциональную характеристику (например, оценку поверхностного CD64) часто используют для ранней диагностики инфекционно-септических осложнений. Оценка уровня мембранного белка CD64 нейтрофилов прочно заняла свое место в ранней диагностике сепсиса у взрослых [3]; однако этот подход не всегда дает существенные результаты у новорожденных. Нейтрофилы детей первого месяца жизни обладают рядом особенностей, делающих новорожденных более восприимчивыми к инфекции, а также затрудняющих диагностику инфекционных осложнений. К этим особенностям относится нарушение распознавания бактериальных липополисахаридов и белков, снижение адгезивности, хемотаксиса, апоптоза, формирования хроматиновых сетей и продукции активного кислорода [4, 5]. Поэтому для диагностики инфекционно-воспалительных процессов в неонатальном периоде чаще пользуются экспрессией HLA-DR на моноцитах [6], в то время как поиск диагностических биомаркеров нейтрофилов, специфичных для новорожденных, сохраняет свою актуальность.

Цель — определить особенности фенотипа нейтрофилов, обладающие прогностическим значением для ранней диагностики инфекционных процессов у новорожденных.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Дизайн исследования. Обсервационное одноцентровое проспективное выборочное неконтролируемое неослепленное экспериментальное исследование.

Критерии соответствия. Критерии включения: возраст до 21 дня; срок гестации выше 35 нед. Критерии невключения: органная дисфункция (балл pSOFA >8) при отсутствии лабораторно-инструментально подтвержденного очага инфекции; подтвержденные молекулярно-генетические аномалии; подозрение на первичный иммунодефицит (низкое содержание Т- и В-клеточных эксцизионных колец TREC и KREC при неонатальном скрининге).

Условия проведения. Исследование проведено на базе ОРИТ, а также на базе госпитальных инфекционных отделений ГБУЗ «Детская городская клиническая больница № 9 им. Г.Н. Сперанского» Департамента здравоохранения Москвы (Москва, Россия).

Продолжительность исследования. В исследование включены пациенты, поступившие в клинику в период с 06 апреля 2022 г. по 20 декабря 2023 г. Продолжительность наблюдения соответствовала длительности лечения в стационаре и составила 16 (11–26) дней. Забор крови на исследование осуществляли в первые сутки после поступления в стационар. Предварительные результаты исследования опубликованы в сборнике работ конкурса молодых ученых научно-образовательной конференции «Актуальные вопросы и инновационные технологии в анестезиологии и реаниматологии» (5–6 апреля 2024 г., Санкт-Петербург) [7], окончательные результаты представлены в настоящей статье.

Описание медицинского вмешательства. Родители всех пациентов, включенных в исследование, подписали форму добровольного информированного согласия на участие. Забор периферической венозной крови осуществляли в вакутейнер с гепарином. Методом проточной цитометрии оценивали экспрессию CD10 на всех нейтрофилах, CD16 на нейтрофилах, высоко экспрессирующих CD62L, и HLA-DR на моноцитах при помощи цитометра FACS Canto II, оснащенного источниками излучения с длиной волны 488, 633, 405 нм в соответствии с инструкцией производителя. Использовали флуоресцентно-меченые моноклональные антитела: CD10 — BB515; CD45 — APC-H7; HLA-DR — PE (BD, США); CD62L — PE-Cy5; CD16 — PE (Beckman Coulter, США). Подробные сведения об используемом оборудовании и реагентах представлены в табл. 1.

 

Таблица 1. Сведения об используемом оборудовании и реагентах

Table 1. Information on equipment and used chemicals

Медицинское изделие	Разрешительный документ	Страна изготовитель	Страна производитель
Цитофлуориметр проточный для клинической лабораторной диагностики in vitro BD FACSCanto II с принадлежностями	Регистрационное удостоверение № ФСЗ 2007/00950 от 8 мая 2008 г.	США	США
Реагенты in vitro и расходные материалы для проточной цитометрии	Регистрационное удостоверение № ФСЗ 2008/01473 от 31 октября 2017 г.	США	США
Реагенты in vitro и расходные материалы для проточной цитометрии	Регистрационное удостоверение № ФСЗ 2008/11445 от 31 октября 2017 г.	США	США
Реагенты диагностические in vitro для цитометрических исследований, в наборах и отдельных упаковках	Регистрационное удостоверение № ФСЗ 2010/07428 от 19 июля 2010 г.	США	США
Реагенты in vitro диагностические для цитометрических исследований, в наборах и отдельных упаковках	Регистрационное удостоверение № ФСЗ 2010/07938 от 28 октября 2010 г.	Франция	США

 

Основной исход исследования. В качестве непрерывных исходов выбраны срок пребывания в ОРИТ и общий срок пребывания в стационаре у пациентов с нормальными и пониженными значениями CD16, CD10 и HLA-DR как среди всех обследованных (n = 261), так и внутри групп «Локализованная инфекция» (n = 95) и «Генерализованная инфекция» (n = 70).

Дополнительные исходы исследования. Дополнительно оценили распределение показателей CD16, CD10 и HLA-DR у пациентов с разной степенью выраженности инфекционного процесса; вычислили пороговые значения этих показателей, связанные с неблагоприятными исходами (смерть или перевод в паллиативное отделение); оценили значения показателей среди пациентов с различными исходами.

Анализ в группах. Вычисление значений показателей CD16, CD10 и HLA-DR проведено в группах:

1. «Контроль» (n = 96) — выполнение критериев включения при отсутствии подтвержденных инфекционно-воспалительных осложнений.
2. «Локализованная инфекция» (n = 95) — выполнение критериев включения при наличии лабораторно-инструментально подтвержденного очага инфекции при отсутствии органной недостаточности.
3. «Генерализованная инфекция» (n = 70) — выполнение критериев включения при наличии лабораторно-инструментально подтвержденного очага инфекции и органной недостаточности (балл pSOFA >8).

Вычисление пороговых значений показателей CD16, CD10 и HLA-DR проведено в двух взаимоисключающих группах «Генерализованная инфекция» (n = 70) и «Отсутствие генерализованной инфекции» (n = 191), а также в группах пациентов с благоприятными (n = 243) и неблагоприятными исходами (n = 18).

Методы регистрации исходов. Непрерывные (сроки пребывания в ОРИТ и в стационаре) и качественные (выписка, смерть, перевод в паллиатив) исходы регистрировались методом выкопировки выписных эпикризов.

Этическая экспертиза. Протокол исследования рассмотрен локальным этическим комитетом ГБУЗ «ДГКБ № 9 им. Г.Н. Сперанского» ДЗМ, протокол заседания № 45, 31 мая 2022 г.

Статистический анализ. Размер выборки предварительно не рассчитывался. Статистическая обработка данных выполнена в пакете SPSS 21 (IBM, США). Количественные данные представлены в формате границ межквартильного диапазона. Сравнение распределений проводили на основании критерия Краскела–Уоллеса для трех независимых групп и на основании критерия Манна–Уитни для двух независимых групп. Оценку чувствительности и специфичности показателей выполняли методом ROC-анализа; точки отсечения построили на основании J-статистики Юдена. Сроки госпитализации пациентов оценивали при помощи анализа Каплана–Майера, при этом выбывшими считали пациентов при выписке (благоприятный исход) и цензурировали умерших или переведенных на паллиатив (неблагоприятный исход). Сравнение распределений сроков госпитализации выполнили при помощи лог-рангового критерия Мантела–Кокса. Критический уровень значимости при проверке статистических гипотез в данном исследовании принимали p = 0,05.

Объекты (участники) исследования. Описание исходных характеристик участников исследования, зафиксированных при включении в исследование, представлено в табл. 2. Группа «Контроль» включает младенцев, госпитализированных в ОРИТ с неинфекционной патологией — синдромом дыхательных расстройств, неонатальной желтухой, а также состояние после операций по поводу врожденных аномалий развития — расщелины нёба, атрезии ануса и др.

 

Таблица 2. Исходные характеристики участников исследования

Table 2. Baseline characteristics of study participants

Группа	n	Доля мальчиков, %	Постнатальный  возраст, сут	Срок гестации,  нед.	Постконцептуальный  возраст, нед.	Балл pSOFA
«Контроль»	96	63,5	3 (3–6)*	38 (36–40)	39,3 (36,7–40,3)	6 (5–7)
«Локализованная инфекция»	95	57,9	5 (4–8)	38 (37–40)	39,6 (37,7–41,0)	6 (5–7)
«Генерализованная инфекция»	70	71,4	5 (3–7)	38 (35–40)	38,9 (35,9–40,4)	10 (9–13)
Все обследованные	261	63,6	4 (3–7)	38 (36–40)	39,1 (37,0–40,6)	7 (5–9)

*Цифры в скобках обозначают интерквартильный диапазон.

*Numbers in brackets indicate interquartile range.

 

Группы «Локализованная инфекция» и «Генерализованная инфекция» включают детей с инфекционными процессами различной локализации: врожденные пневмонии, некротизирующие энтероколиты, инфекции мочевыводящих путей, абсцессы кожи и омфалиты. Всего зарегистрировано 8 летальных исходов; 10 детей оформлены как паллиативные.

РЕЗУЛЬТАТЫ

Основные результаты исследования

Снижение уровня CD16 оказалось связано с увеличением медианы реанимационного койко-дня с 4 до 8, общего койко-дня — с 14 до 22. Снижение уровня CD10 также связано с удлинением пребывания в ОРИТ с 4 до 8 койко-дней, и в стационаре — с 14 до 19 койко-дней. Аналогично падение HLA-DR оказалось связано с более длительным пребыванием в ОРИТ и общей госпитализацией: 4 против 8 койко-дней и 14 против 21 койко-дня соответственно. При одновременном рассмотрении показателей функциональной активности нейтрофилов CD16 и CD10 выяснилось, что медиана срока пребывания в ОРИТ у пациентов со снижением CD16 при нормальном CD10 не отличалась от нормы и составила 4 койко-дня, в то время как при снижении обоих показателей увеличилась до 11 койко-дней. Аналогично медиана общей длительности госпитализации у пациентов со снижением CD16 при нормальном CD10 незначительно превышала норму и составляла 16 койко-дней, а при снижении обоих показателей — увеличилась до 23 койко-дней. При оценке сроков госпитализации внутри групп выяснилось, что среди пациентов в группе «Локализованная инфекция» снижение CD16 связано с увеличением медианы пребывания в ОРИТ с 4 до 6 койко-дней и медианы общей длительности госпитализации с 13 до 19 койко-дней. Среди пациентов в группе «Генерализованная инфекция» снижение CD10 оказалось ассоциировано с увеличением медианы пребывания в ОРИТ с 7 до 11 койко-дней и медианы общей длительности госпитализации с 19 до 27 койко-дней. Все приведенные различия оказались статистически значимыми. Подробная статистическая сводка представлена в табл. 3; кривые Каплана-Майера — на рис. 1.

 

Рис. 1. Кривые Каплана–Майера продолжительности пребывания в отделении реанимации и интенсивной терапии (ОРИТ) и в госпитальном отделении стационара у пациентов с различными значениями CD16, CD10 и HLA-DR. Цензурированные события соответствуют неблагоприятным исходам: К/д — койко-дни

Fig. 1. Kaplan–Meier curves for ICU stay and total length of stay for patients with different CD16, CD10 and HLA-DR values. Censored events indicate unfavourable outcomes

 

Дополнительные результаты исследования

В контрольной группе показатель HLA-DR моноцитов находился в диапазоне 7,94–18,1 тыс. ед. флуоресценции (ед. фл.); в группе инфекционного очага — 5,65–15,1 тыс. ед. фл.; в группе сепсиса — 3,72–7,69 тыс. ед. фл. (H = 47,7; р = 4,40×10^–11). Показатель CD16 у пациентов контрольной группы варьировал в диапазоне 33,0–54,9 тыс. ед. фл.; у пациентов с инфекционным очагом без органной недостаточности значимо не отличался и составил 26,2–52,9 тыс. ед. фл., в то время как у детей с сепсисом этот параметр был достоверно ниже — 15,8–35,4 тыс. ед. фл. (H = 41,3; р = 1,08×10^–9). Экспрессия CD10 нейтрофилами у новорожденных в контрольной группе составила 3,56–10,3 тыс. ед. фл., у пациентов с инфекционным очагом — 5,27–15,0 тыс. ед. фл., а у детей с течением сепсиса — 1,69–8,43 тыс. ед. фл. (H = 18,0; р = 1,24×10^–4). Распределение показателей среди пациентов в группах показано на рис. 2.

 

Рис. 2. Распределение показателей HLA-DR, CD16 и CD10 среди пациентов в группах

Fig. 2. Distribution of HLA-DR, CD16 and CD10 among patients in groups

 

Проанализировали показатели, связанные с неблагоприятными исходами вследствие генерализации инфекции у пациентов в ОРИТ (n = 18). Выявлено достоверное снижение уровней CD10 и CD16 в случаях с неблагоприятными исходами: у выздоровевших детей CD10 находился в диапазоне 3,05–10,4 тыс. ед. фл. по сравнению с 1,13–3,56 тыс. ед. фл. (Z = 2,86; U = 675; р = 0,029); CD16 — в диапазоне 24,8–50,7 тыс. ед. фл. по сравнению с 9,20–25,2 тыс. ед. фл. (Z = 3,39; U = 2211; р = 6,90×10^–4). Распределение показателей CD16 и CD10 среди пациентов с различными исходами показано на рис. 3.

 

Рис. 3. Распределение показателей CD16 и CD10 среди пациентов с различными исходами

Fig. 3. Distribution of CD16 and CD10 scores among patients with different outcomes

 

Таблица 3. Средние и медианы сроков госпитализации и пребывания в отделении реанимации и интенсивной терапии

Table 3. Mean and median lengths of hospitalization and ICU stay

Показатель	Группа	Среднее			Медиана			Лог-ранговый критерий Мантела–Кокса
		оценка	ст. ошибка	95 % ДИ	оценка	ст. ошибка	95 % ДИ	хи- квадрат	степени свободы	p
Общие койко-дни
Снижение CD16	Нет	18,3	1,5	15,3–21,2	14	0,5	13,0–15,0	27,5	1	1,58×10–7
	Да	27,7	1,9	24,1–31,3	22	1,3	19,5–24,5
	Всего	23,0	1,3	20,5–25,5	16	0,8	14,5–17,5
Снижение CD10	Нет	16,1	1,0	14,1–18,0	14	0,9	12,3–15,7	17,6	1	2,78×10–5
	Да	25,9	2,2	21,5–30,2	19	1,6	15,8–22,2
	Всего	21,0	1,3	18,5–23,5	16	1,1	13,9–18,1
Снижение HLA-DR	Нет	19,0	1,3	16,4–21,6	14	0,6	12,9–15,1	16,9	1	4,03×10–5
	Да	28,2	2,3	23,7–32,8	21	1,6	18,0–24,0
	Всего	22,9	1,3	20,4–25,4	16	0,8	14,5–17,5
Снижение CD10 и CD16	Нет	16,0	1,3	13,5–18,5	14	0,6	12,8–15,2	25,2	2	3,36×10–6
	Снижен только CD16	21,6	3,5	14,7–28,4	16	2,2	11,6–20,4
	Снижены 2 показателя	29,5	2,7	24,3–34,7	23	2,1	18,8–27,2
	Всего	21,1	1,3	18,6–23,6	16	1,1	13,9–18,1
Снижение CD16 («Локализованная инфекция»)	Нет	14,9	1,2	12,6–17,2	13	0,6	11,9–14,1	12,5	1	4,14×10–4
	Да	23,9	2,3	19,4–28,4	19	3,9	11,3–26,7
	Всего	18,3	1,2	15,9–20,7	14	0,7	12,7–15,3
Снижение CD10 («Генерализованная инфекция»)	Нет	23,1	3,2	16,8–29,4	19	1,3	16,4–21,6	4,3	1	0,037
	Да	32,2	3,2	25,9–38,5	27	2,4	22,2–31,8
	Всего	29,6	2,5	24,7–34,6	23	1,5	20,1–25,9
Реанимационные койко-дни
Снижение CD16	Нет	7,0	1,2	4,8–9,3	4	0,4	3,2–4,8	28,5	1	9,33×10–8
	Да	12,4	1,3	9,9–14,9	8	0,8	6,5–9,5
	Всего	10,1	1,1	8,1–12,2	5	0,3	4,3–5,7
Снижение CD10	Нет	5,4	0,7	4,1–6,8	4	0,5	3,0–5,0	21,8	1	3,01×10–6
	Да	12,6	1,8	9,1–16,0	8	1,2	5,7–10,3
	Всего	9,1	1,0	7,2–11,1	5	0,4	4,1–5,9
Снижение HLA-DR	Нет	7,3	0,9	5,5–9,1	4	0,4	3,1–4,9	15,8	1	7,16×10–5
	Да	12,9	1,8	9,4–16,4	8	0,7	6,6–9,4
	Всего	10,1	1,1	8,0–12,2	5	0,3	4,3–5,7
Снижение CD10 и CD16	Нет	6,6	1,1	4,5–8,7	4	0,5	3,1–4,9	21,5	2	2,13×10–5
	Снижен только CD16	8,1	2,4	3,5–12,7	4	0,6	2,9–5,1
	Снижены 2 показателя	14,5	2,4	9,9–19,1	11	1,0	9,0–13,0
	Всего	9,2	1,0	7,2–11,2	5	0,4	4,1–5,9
Снижение CD16 («Локализованная инфекция»)	Нет	5,2	0,9	3,5–7,0	4	0,5	3,0–5,0	6,7	1	9,68×10–3
	Да	9,8	1,6	6,6–12,9	6	1,4	3,2–8,8
	Всего	7,0	0,9	5,3–8,7	5	0,3	4,3–5,7
Снижение CD10 («Генерализованная инфекция»)	Нет	8,5	2,0	4,6–12,3	7	0,6	5,9–8,1	6,5	1	0,011
	Да	16,7	3,0	10,7–22,6	11	1,0	9,0–13,0
	Всего	14,4	2,3	9,9–19,0	9	0,6	7,9–10,1

 

При помощи ROC-анализа построены точки отсечения, падение уровня показателей ниже которых свидетельствует о вероятности неблагоприятного исхода. Для дальнейшего ROC-анализа вся совокупность обследованных больных была разделена на две взаимоисключающие группы: с генерализацией инфекции и без нее. С помощью этой группировки вычислены точки отсечения для CD10, CD16 и HLA-DR, определяющие вероятность течения сепсиса у пациента. Значения показателей в точках отсечения, а также чувствительность и специфичность оценок представлены в табл. 4; ROC-кривые показаны на рис. 4.

 

Рис. 4. ROC-кривые для показателей CD10 и CD16 в зависимости от исхода (a) и для показателей CD10, CD16 и HLA-DR в зависимости от наличия генерализации инфекции (b)

Fig. 4. ROC curves for CD10 and CD16 depending on the outcome (a) and for CD10, CD16 and HLA-DR depending on the presence of generalized infection (b)

 

Нежелательные явления

Нежелательные явления в ходе проведения исследования медицинского вмешательства отсутствовали.

ОБСУЖДЕНИЕ

Резюме основного результата исследования

Доказано, что CD10 и CD16 на поверхности нейтрофилов перспективны в качестве прогностических биомаркеров неонатального сепсиса. Построены пороговые значения, падение показателей ниже которых говорит о риске развития инфекционно-септических осложнений у новорожденных. Падение CD10 ниже чем на 60 % от точки отсечения и CD16 ниже чем на 70 % от точки отсечения свидетельствует о возможности летального исхода. Одновременное исследование CD10 и CD16 увеличивает точность диагностики, исключая ложное определение пониженного уровня CD16 при нормальном уровне CD10. Диагностическая чувствительность и специ фичность определения CD10 и CD16 сопоставима с HLA-DR моноцитов, широко используемым для диагностики неонатального сепсиса в России и за рубежом.

Обсуждение основного результата исследования

CD10 (неприлизин, нейтральная эндопептидаза) представляет собой цинковую металлопротеиназу нейтрофилов, которая расщепляет пептиды по аминогруппе гидрофобных аминокислот [8]. Экспрессия CD10 характерна для зрелых нейтрофилов, которые могут обладать как провоспалительным, так и противовоспалительным потенциалом [9]. В частности, CD10⁺ALPL⁺-нейтрофилы задействованы в формировании резистентности к терапии чек-пойнт-ингибиторами в онкологии за счет необратимого подавления активности Т-лимфоцитов внутри опухоли [10]. Поэтому в норме популяция зрелых CD10⁺-нейтрофилов способна поддерживать воспалительный ответ, с одной стороны, с другой — ограничивая и локализуя его при необходимости. В то же время CD10^–-нейтрофилы стимулируют выживание Т-лимфоцитов и активируют в них выработку интерферона-γ [9], они обладают слабой противовоспалительной активностью по отношению к Т-клеточному звену. Этот факт объясняет обнаруженное в работе повышение уровня CD10 на мембране нейтрофилов у пациентов с локализованной инфекцией за счет выхода в кровоток зрелых клеток и снижение уровня CD10 при генерализации инфекционных осложнений, сопровождающейся появлением в кровотоке незрелых форм нейтрофилов, избыточно активирующих Т-клеточный иммунитет. Наши данные согласуются с результатами [11], полученными на модели приматов и взрослых людей-добровольцев, которым вводили 10⁸ КОЕ/кг Escherichia coli или 4 нг/кг липополисахарида соответственно. В обоих случаях авторы наблюдали достоверное обратимое снижение экспрессии CD10-нейтрофилов, которое сопровождалось лихорадкой с ознобами, тошнотой и миалгиями. На клинической модели сепсиса у взрослых показано, что зрелые CD10⁺-нейтрофилы низкой плотности подавляют пролиферацию лимфоцитов, в то время как CD10^– ее активируют [12, 13]. Приведенные литературные и экспериментальные данные подтверждают гипотезу «аварийного гемопоэза» при сепсисе, характеризующегося повышенным рекрутированием нейтрофилов из костного мозга на фоне подавления их апоптоза на периферии.

CD16 (Fcγ-рецептор III типа, человеческий нейтрофильный аллоантиген 1, HNA-1) является одной из основных иммуногенных молекул нейтрофила у взрослых и детей [14]. В норме CD16 экспрессируется на поверхности всех нейтрофилов, независимо от их локализации и степени активации [15], поэтому для выделения субпопуляций клеток с различной функциональной активностью используют дополнительные поверхностные маркеры, в частности CD62L (L-селектин). Принято выделять популяции: зрелые клетки CD16⁺CD62L⁺, незрелые палочкоядерные формы CD16^низк.CD62L⁺, иммуносупрессивные клетки CD16⁺CD62L^низк. [16] и апоптотические нейтрофилы CD16^низк.CD62L^низк. [17]. Показано, что наличие клеток, высоко экспрессирующих CD16 и низко — CD62L, ассоциировано с инфекционными осложнениями и неблагоприятным прогнозом у пациентов с течением острого респираторного дистресс-синдрома на фоне сепсиса [18]. Поэтому в настоящей работе оценивали содержание функционально полноценных CD16⁺CD62L⁺-нейтрофилов. Выявление сниженного уровня экспрессии CD16 на CD62L⁺-клетках по нашим данным оказалось ассоциировано с повышенным риском развития и генерализации инфекции, реализующимся, вероятно, за счет супрессивного фенотипа юных форм CD62L⁺ нейтрофилов [16, 17], в большом количестве выделяющихся при «аварийном гемопоэзе». Кроме того, снижение поверхностного CD16 характерно для начальных стадий процесса клеточной гибели нейтрофилов [19], который запускается при инфекционно-воспалительных осложнениях во время образования нейтрофильных хроматиновых сетей. Снижение уровня CD16 оказалось связано с подавлением генов, ответственных за функциональную активность нейтрофилов в модели колоректального рака [20]; постепенная потеря CD16, ассоциированная с подавлением фагоцитоза, обнаружена у людей в процессе старения [21].

Таким образом, представленные в работе данные о повышенном риске инфекционно-септических осложнений у пациентов со сниженными CD10 и CD16 согласуются с современным представлением о роли этих поверхностных молекул в функционировании нейтрофилов.

Ограничения исследования

В настоящем исследовании не учитывается воздействие срока гестации новорожденных на экспрессию CD10 и CD16 нейтрофилов. Представляется целесообразным выделение групп пациентов с различной локализацией инфекции, а также различным этиологическим фактором: грамнегативные и грампозитивные микроорганизмы, инфекция дрожжевыми и плесневыми грибами. Кроме того, дальнейшей проверки требует возможность применения CD10 и CD16 нейтрофилов у пациентов с первичными иммунодефицитами, в частности, с заболеваниями, обусловленными генетическим дефектом нейтрофильной функции.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

На сегодняшний день известно, что по уровню экспрессии CD10 и CD16 на поверхности нейтрофилов можно судить об их степени зрелости и функциональной полноценности. Снижение этих параметров выявляется при воспалительных процессах различной этиологии. При этом до сих пор не было данных о том, обладают ли эти показатели какой-либо прогностической ценностью или являются моментными индикаторами активации миелопоэза под воздействием провоспалительных цитокинов. В работе продемонстрировано, что снижение CD10 и CD16 нейтрофилов в начале наблюдения за пациентом является неблагоприятным прогностическим фактором. Оно связано с увеличением как срока пребывания в ОРИТ, так и общей длительности госпитализации. Пациенты с неблагоприятным исходом характеризуются более выраженным снижением показателей. Чувствительность и специфичность оценки CD10 и CD16 нейтрофилов сопоставимы с данными, имеющимися для конвенционального биомаркера неонатального сепсиса — HLA-DR моноцитов. Поэтому авторам представляется целесообразным использование CD10 и CD16 нейтрофилов в качестве дополнительного метода диагностики инфекционно-септических осложнений у новорожденных в клинической практике.

ДОПОЛНИТЕЛЬНАЯ ИНФОРМАЦИЯ

Вклад авторов. Все авторы внесли существенный вклад в разработку концепции, проведение исследования и подготовку статьи, прочли и одобрили финальную версию перед публикацией. Личный вклад каждого автора: И.В. Образцов — идея, дизайн исследования, анализ данных, обзор литературы, написание текста и редактирование рукописи; А.А. Образцова — анализ данных, подготовка датафрейма, сбор и анализ литературных источников, написание текста; О.В. Воронина, Е.А. Черникова — клиническое ведение пациентов, заполнение первичной базы данных, написание текста; А.Ю. Мищенко, М.А. Гордукова, Н.В. Давыдова — проточная цитометрия, написание текста; Ю.В. Жиркова — клиническое ведение пациентов, редактирование рукописи, административная поддержка; А.А. Корсунский — административная поддержка, редактирование рукописи.

Источник финансирования. Исследование и публикация осуществлены при поддержке автономной некоммерческой организации «Московский центр инновационных технологий в здравоохранении», соглашение о предоставлении гранта на реализацию научно-практического проекта в сфере медицины № 1712-3/22 от 06 апреля 2022 г.

Конфликт интересов. Авторы декларируют отсутствие явных и потенциальных конфликтов интересов, связанных с проведенным исследованием и публикацией настоящей статьи.

Этический комитет. Протокол исследования был одобрен локальным этическим комитетом ГБУЗ «ДГКБ № 9 им. Г.Н. Сперанского» ДЗМ (№ 45, 31.05.2022).

ADDITIONAL INFO

Authors’ contribution. Аll authors made a substantial contribution to the conception of the study, acquisition, analysis, interpretation of data for the work, drafting and revising the article, final approval of the version to be published and agree to be accountable for all aspects of the study. Personal contributions of each author: I.V. Obraztsov — idea, study design, data analysis, literature review, scientific writing and editing the manuscript; A.A. Obraztsova — data analysis, dataframe preparation, collection and analysis of the literature, scientific writing; O.V. Voronina, E.A. Chernikova — clinical management of patients, primary database preparation, scientific writing; A.Yu. Mishchenko, M.A. Gordukova, N.V. Davydova — flow cytometry, scientific writing; Yu.V. Zhirkova — clinical management of patients, manuscript editing, administrative support; A.A. Korsunsky — administrative support, manuscript editing.

Funding source. This work is supported by the autonomous non-profit organization “Moscow Center for Innovative Technologies in Healthcare”, grant agreement for the implementation of a scientific and practical project in the field of medicine № 1712-3/22 dated April 6, 2022.

Competing interests. The authors declare that they have no competing interests.

Ethics approval. The present study protocol was approved by the local Ethics Committee of the Speransky Children's City Clinical Hospital No. 9 (No. 45, 2022 May 31).

作者简介

Igor Obraztsov

Speransky Children’s City Clinical Hospital No. 9

编辑信件的主要联系方式.
Email: obraztsoviv@zdrav.mos.ru
ORCID iD: 0000-0002-6649-853X
SPIN 代码: 6466-5680

MD, Cand. Sci. (Medicine)

俄罗斯联邦, 29 Shmitovskii av., Moscow, 123317

Anastasiia Obraztsova

Speransky Children’s City Clinical Hospital No. 9

Email: obraztsovaaa@zdrav.mos.ru

MD

俄罗斯联邦, 29 Shmitovskii av., Moscow, 123317

Oksana Voronina

Speransky Children’s City Clinical Hospital No. 9

Email: tkachukviktor601@gmail.com
ORCID iD: 0009-0001-5942-2430

MD

俄罗斯联邦, 29 Shmitovskii av., Moscow, 123317

Ekaterina Chernikova

Speransky Children’s City Clinical Hospital No. 9

Email: krasenkova.ea@gmail.com
ORCID iD: 0000-0001-9409-7832
SPIN 代码: 6346-9181
俄罗斯联邦, 29 Shmitovskii av., Moscow, 123317

Anastasiya Mishchenko

Speransky Children’s City Clinical Hospital No. 9

Email: nasta.tlt@mail.ru
ORCID iD: 0009-0003-1353-1441
SPIN 代码: 4509-8053

MD

俄罗斯联邦, 29 Shmitovskii av., Moscow, 123317

Maria Gordukova

Speransky Children’s City Clinical Hospital No. 9

Email: gordukovama@zdrav.mos.ru
ORCID iD: 0000-0002-3948-8491
SPIN 代码: 2205-4033

MD, Cand. Sci. (Medicine)

俄罗斯联邦, 29 Shmitovskii av., Moscow, 123317

Nataliia Davydova

Speransky Children’s City Clinical Hospital No. 9

Email: nata1902@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0002-7325-6045
SPIN 代码: 9997-6197

MD, Cand. Sci. (Medicine)

俄罗斯联邦, 29 Shmitovskii av., Moscow, 123317

Julia Zhirkova

Speransky Children’s City Clinical Hospital No. 9; Pirogov Russian National Research Medical University

Email: zhirkova@mail.ru
ORCID iD: 0000-0001-7861-6778
SPIN 代码: 5560-6679

MD, Dr. Sci. (Medicine), Associate Professor

俄罗斯联邦, 29 Shmitovskii av., Moscow, 123317; 117513, Moscow, st. Ostrovityanova, house 1

Anatoly Korsunskiy

Speransky Children’s City Clinical Hospital No. 9; Sechenov First Moscow State Medical University

Email: dr_kaa@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-9087-1656
SPIN 代码: 6374-0484

MD, Dr. Sci. (Medicine), Professor

俄罗斯联邦, 29 Shmitovskii av., Moscow, 123317; 119991, Moscow, Bolshaya Pirogovskaya st., building 2, building 4

参考

补充文件